GALERIE D'IDENTIFICATION MINIATURISEE LE SYSTEME API
Lorqu'une suspension bactérienne de densité convenable est répartie dans les différentes alvéoles qui composent la microgalerie (contenant de substrats ...
PRINCIPE : Le système API® BioMérieux (Appareillage et Procédé d’Identification) est une version miniaturisée et standardisée des techniques biochimiques conventionnelles pour l’identification des bactéries. Lorqu’une suspension bactérienne de densité convenable est répartie dans les différentes alvéoles qui composent la microgalerie (contenant de substrats déshydratés), les métabolites produits durant la période d’incubation se traduisent par des changements de couleur spontanés ou révélés par addition de réactifs. Elle permet l’identification d’une centaine de bacilles à Gram négatif dont les Entérobactéries. Elle comprend 20 tests biochimiques. TECHNIQUE : Ö Préparation de la galerie • Réunir fond et couvercle d’une boîte d’incubation et répartir de l’eau dans les alvéoles pour créer une atmosphère humide. • Déposer stérilement la galerie dans la boîte d’incubation Ö Préparation de l’inoculum • Ouvrir une ampoule de Suspension Medium (ou un tube d’eau distillée stérile) • Prélever une seule colonie bien isolée sur milieu gélosé • Réaliser une suspension bactérienne faible (opacité 0,5 sur l’échelle Mc Farland) Ö Inoculation de la galerie Remplissage des tubes : Remplir les tubules et les cupules des tests du type CIT Remplir les tubules des tests du type ADH et remplir la cupule avec de l’huile de paraffine, pour créer l’anaérobiose.
Pipette Pasteur Cupule
Tubule
Remplir uniquement les tubules des tests restants
Remplir en posant la pipette contre la paroi de la cupule.
Remarque : il est important de veiller à ne pas créer de bulles lors de l’inoculation qui pourraient fausser le résultat. De plus l’apparition de bulles après incubation apportera un caractère d’identification supplémentaire (GAZ+) RESULTATS : • Noter sur la fiche de résultats toutes les réactions spontanées. • Réaliser les tests nécessitant l’addition de réactifs : Test VP, TDA, IND, Nitrate réductase… IDENTIFICATION : • Avec le tableau d’identification : comparer les réactions notées sur la fiche de résultats avec celle du tableau : chaque cellule de ce tableau contient les pourcentages de positivité • Avec le catalogue analytique : Les tests sont regroupés en groupe de 3, et une valeur (1, 2 ou 4) est indiquée pour chacun. Additionner à l’intérieur de chaque groupe les nombres correspondants aux tests positifs. On obtient un nombre à 7 chiffres qui sert de code d’identification • Avec un logiciel d’identification
TABLEAU DE LECTURE DE LA GALERIE MINIATURISEE API 20E Microtube
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